从根本上讲,离心机是一种分离混合物的机器。 它通过以高速旋转样品来实现这一点,产生强大的力,根据组分的密度、大小和形状对它们进行分类。这个过程称为离心,是分离悬浮在液体中的颗粒或分离不互溶液体的一种基本技术。
离心机不会产生新的力;它利用极端的角速度来放大重力的影响。这使得原本需要数小时、数天甚至数年才能自行分离的物质能够快速分离。
基本原理:放大重力
从重力到 G 力的转变
在正常条件下,重力会随着时间的推移使较密集的颗粒从液体中沉降出来。想象一下水杯底部沉淀的沙子。
这种称为沉降的自然过程,对于科学和工业的实际应用来说通常太慢了。离心机极大地加速了这个过程。
惯性和力的作用
当离心机的核心部件——转子旋转时,样品管被迫以一个固定的圆周运动。样品中的颗粒具有惯性——它们抵抗这种方向的改变,并试图沿直线运动。
由于管壁是弯曲的,这种向外的惯性力将颗粒推向管底。这种效应通常被称为离心力,其测量单位是地球重力加速度的倍数(g 力的单位或 RCF)。
分离如何发生
这种强烈的 g 场作用于混合物中的每个颗粒,但对密度更大、更大的颗粒影响更强。
因此,密度最大的组分最快迁移到管底,形成一层紧密堆积的固体层,称为沉淀物(pellet)。
留在上层的密度较小的液体称为上清液(supernatant)。这种清晰的分离使得两种组分可以很容易地被分离出来。
常见应用及其目的
在临床和生物实验室中
离心在生命科学中是不可或缺的。主要用途是将全血分离成其组成部分:红细胞、白细胞和血浆。
它还用于从培养基中收集细胞、在提取方案中分离 DNA,或将线粒体等亚细胞组分与细胞内其他物质分离。
在化学和工业过程中
工业依赖大型离心机进行纯化和分离。这包括在乳制品行业中将奶油与牛奶分离,以及通过去除酵母细胞来澄清葡萄酒或啤酒。
化工和制药行业利用离心来纯化化合物并将反应产物与残留溶剂分离。
在环境科学中
环境分析师使用离心机分析水样。通过旋转水,他们可以将微生物、微塑料或污染物浓缩成一个小的、可测量的沉淀物,从而更容易检测和研究它们。
了解权衡和关键参数
速度(RPM)与力(RCF)
虽然速度以每分钟转数(RPM)为单位设置,但实际的分离力是相对离心力(RCF),即 g 力的单位。
RCF 同时取决于 RPM 和转子的半径(从旋转中心到样品的距离)。以 RCF 报告分离参数比仅使用 RPM 更具科学准确性和可重复性。
体积与速度
不同的离心机专为不同的任务设计,需要在样品体积和最大速度之间进行权衡。
- 微量离心机以高速度旋转小管(低于 2 mL),用于分子生物学任务。
- 大容量离心机以较低的速度旋转较大的瓶子或血袋。
- 超速离心机是一个专业类别,可产生巨大的 RCF(超过 100,000 x g),用于分离非常小的颗粒,如病毒或单个蛋白质。
平衡的关键重要性
最常见的操作错误是未能平衡转子。高速下不平衡的负载会导致剧烈振动,从而可能损坏机器并带来严重的安全隐患。
每个样品都必须通过放置在转子中与其正对面、重量完全相同的另一个样品来平衡。
为您的目标做出正确的选择
您使用的离心机类型和设置完全取决于您需要分离什么。
- 如果您的主要重点是分离完整细胞或大碎片: 标准的台式离心机,以较低到中等的 RCF(500 - 5,000 x g)即可满足要求。
- 如果您的主要重点是分离亚细胞器或沉淀 DNA: 您将需要一台高速冷冻离心机,以产生更高的 g 场力,同时保护样品免受热量影响(10,000 - 25,000 x g)。
- 如果您的主要重点是分离蛋白质或病毒等大分子: 需要使用超速离心机来产生将这些微小颗粒沉淀所需的极端力(超过 100,000 x g)。
归根结底,理解离心就是认识到它是加速自然过程的有力工具,从而在无数的科学和工业领域中实现发现和生产。
总结表:
| 关键离心机参数 | 描述 | 常见用例 |
|---|---|---|
| RCF (g 场力) | 相对离心力;实际的分离能力。 | 标准化、可重复的分离。 |
| RPM | 每分钟转数;转子的速度。 | 机器设置,但 RCF 更准确。 |
| 微量离心机 | 高速处理小体积样品(<2 mL)。 | 分子生物学(例如 DNA 沉淀)。 |
| 高速离心机 | 中等到高 RCF(10,000 - 25,000 x g),通常带有制冷功能。 | 分离细胞器,收集细胞。 |
| 超速离心机 | 极高的 RCF(>100,000 x g)。 | 分离蛋白质、病毒、大分子。 |
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