根据同行评审的发现,在-70°C储存微生物是一种高效且被广泛接受的长期保存方法。研究证实,包括细菌、酵母和霉菌在内的多种微生物在经过此温度储存后能够成功复苏,不仅保留了其活力,还保留了关键的功能特性。
核心挑战不仅仅是让微生物存活,而是确保它们在未来的实验中保持遗传和功能上的不变。研究证实,-70°C是一个稳健的标准,能有效阻止代谢活动,从而在长时间内保持大多数微生物的完整性。
关于-70°C储存的科学共识
几十年来,设置为-70°C(或类似温度)的超低温冰箱一直是微生物实验室的基石。这种做法得到了数据支持,证明了其在保存各种生物样本方面的可靠性。
保持活力和功能
一项关键研究表明,储存在-70°C的酵母和霉菌能够成功复苏。重要的是,这些复苏的菌株在药物MICs(最低抑菌浓度测试)方面表现出良好的重现性。
这一发现意义重大,因为它证明了-70°C储存不仅能保持活力,还能保持特定的功能特性,这对于获得一致的实验结果至关重要。
微生物的广泛适用性
-70°C储存的有效性不仅限于真菌。它也是保存细菌和病毒的经过验证的标准,使其成为普通微生物收藏的多功能温度。
历史上,超低温冰箱通常设置为-65°C或-70°C,将此温度范围确立为可靠的行业基准。
核心细胞组分的稳定性
-70°C储存的成功在于其能够保存细胞的基本组成部分。在此温度下,关键的生物分子如核酸(DNA和RNA)和大多数蛋白质保持稳定。
通过防止这些组分的降解,微生物的遗传和功能特性得以安全维护。
了解权衡和最佳实践
虽然-70°C是一个经过验证的标准,但要实现成功的保存,需要了解其背景和局限性。它并非对每一种生物或情况都是普遍完美的解决方案。
“少数例外”
即使在报告高成功率的研究中,研究人员也指出,少数分离株可能是例外。并非每个菌株或物种都会对冻融循环作出相同的反应。
一些特别敏感的生物,即使在标准协议下储存,在复苏时也可能表现出活力降低。对少量非关键批次进行预测试始终是谨慎的做法。
冷冻保护剂的关键作用
在任何超低温下成功进行长期储存,不仅仅是温度本身的问题。它几乎总是依赖于在冷冻前将冷冻保护剂(如甘油或DMSO)与培养物混合使用。
这些试剂可以防止形成大而尖锐的冰晶,这些冰晶会刺破细胞膜并杀死微生物。研究中的积极发现隐含地依赖于这种最佳实践。
-70°C与其他标准的比较
现代超低温冰箱通常设置为-80°C,这比-70°C提供了略微更高的安全性。对于最终的长期保存,特别是对于不可替代或高度敏感的培养物,在液氮中或液氮上方储存(-196°C)仍然是黄金标准。
如何将其应用于您的项目
您选择的储存温度取决于样本的性质和研究目标。
- 如果您的主要重点是常规、长期储存常见的细菌、酵母或霉菌: -70°C冰箱是经过科学验证且高度可靠的选择。
- 如果您的主要重点是保存特定的功能特性(例如,抗生素耐药性): 研究表明,-70°C储存为此类特性提供了良好的重现性。
- 如果您的主要重点是存档不可替代、新颖或高度敏感的菌株: 考虑使用气相液氮以获得最大的长期安全性和活力。
最终,-70°C储存是现代微生物学中一个稳健且有证据支持的支柱,通过可靠的样本保存实现了可重现的科学。
总结表:
| 主要发现 | 对您实验室的意义 |
|---|---|
| 保持活力和功能特性(例如,药物MICs) | 确保实验结果随时间推移具有可重现性。 |
| 对细菌、酵母、霉菌和病毒有效 | 通用微生物收藏的多功能解决方案。 |
| 保持核酸和蛋白质的稳定性 | 保护培养物的遗传和功能特性。 |
| 需要使用冷冻保护剂(例如,甘油) | 最佳实践对于防止冰晶损伤至关重要。 |
| 少数分离株可能是例外 | 建议对敏感菌株进行预测试。 |
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同行评审研究证实,-70°C储存是保存细菌、酵母和霉菌活力和功能特性的稳健标准。选择合适的设备对于实现这些结果并保持研究的可重现性至关重要。
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