超低温（ULT）冷冻是一种专门的保存方法，它利用极端低温（通常在-45°C至-86°C之间）来储存敏感的生物材料。其主要目的是几乎完全停止所有生物和化学活动，从而保持细胞、组织和先进药物等样本的完整性、结构和活性，以便在研究和医学领域长期使用。
生物保存的核心挑战是防止分子运动和冰晶形成引起的降解。超低温通过在细胞层面有效暂停时间来解决这个问题，确保样本从冷冻的那一刻起保持不变。
阻止生物衰变的科学
标准冰箱（工作温度约为-20°C）不足以长期保存复杂的生物材料。ULT冷冻是必要的，因为它在更低的温度下会发生特定的物理和化学变化。
为什么标准冷冻会失败
当水缓慢结冰时，会形成大的、锋利的冰晶。在生物细胞内部，这些晶体就像微小的刀片，刺穿细胞膜并破坏内部结构。这种物理损伤通常是不可逆的，并使样本对大多数科学应用而言毫无用处。
停止所有酶活性
即使在冷冻状态下，许多酶和化学反应仍可能以非常缓慢的速度进行，导致DNA、RNA、蛋白质和其他关键分子逐渐降解。将温度降至-80°C或以下可有效停止这种分子活动，防止这种缓慢衰变并确保真正的长期稳定性。
实现“玻璃状”状态
快速、超低温冷冻的目标是玻璃化。这个过程使细胞内外的水迅速冷却，以至于没有时间形成破坏性的晶体。相反，它凝固成一种稳定的、玻璃状的无定形状态，将所有细胞成分固定到位，而不会造成结构损伤。
ULT冷冻的关键应用
完美保存生物功能对于众多科学和医学领域至关重要。ULT冷冻箱是这项工作的基本工具。
研究和生物样本库
实验室使用ULT冷冻箱建立生物样本库，这些是生物样本的有序集合。这包括储存细胞系、细菌、病毒培养物、组织样本以及提取的DNA或RNA，以供未来的实验使用，确保研究人员在多年内都能获得一致且可用的材料。
药物和疫苗稳定性
许多现代生物药物、酶和疫苗（尤其是基于mRNA的疫苗）都极其脆弱。ULT储存对于在整个生产过程和供应链中保持其分子结构和功效至关重要，这种做法被称为“冷链”。
再生医学
用于未来治疗用途的干细胞、脐带血和组织移植物的储存完全依赖于ULT低温保存。这项技术使得这些活体材料能够保持活性多年，直到需要用于患者治疗。
了解风险和最佳实践
尽管功能强大，但ULT冷冻是一个不容有失的过程。未能遵守严格的协议可能导致宝贵样本的完全丢失。
冻融循环的危险
即使是微小的温度波动也可能具有破坏性。每次样本稍微升温并重新冷冻时，小冰晶都会在再结晶过程中变大，造成渐进性损伤。应迅速处理样本，并且不应让冷冻箱门长时间打开。
设备可靠性不容妥协
ULT冷冻箱是可能无法替代的工作的单一故障点。机械故障或停电可能是灾难性的。因此，这些系统需要强大的警报系统、24/7温度监控以及备用电源发电机或辅助冷冻装置。
冷冻保护剂的重要性
对于许多细胞类型，仅仅冷冻它们是不够的。样本通常在含有冷冻保护剂（如DMSO或甘油）的特殊溶液中制备。这些化学物质有助于防止冰晶形成并保护细胞免受极端寒冷的压力。
为您的目标做出正确选择
ULT储存的正确实施完全取决于您的具体目标。清晰了解您的优先事项将决定您的程序和设备需求。
- 如果您的主要关注点是长期研究可行性： 优先考虑细致的样本盘点，并通过组织冷冻箱内容以便快速取用，最大限度地减少冻融循环。
- 如果您的主要关注点是临床或药物生产： 遵守经过验证的协议（SOP）、完美的设备监控以及保持不间断的冷链是您最关键的任务。
- 如果您是ULT储存的新手： 您的第一步是投资购买高质量的冷冻箱，配备可靠的警报和备用系统，然后再制定详细的样本管理计划。
通过掌握这些原则，您可以确保您的关键生物材料得到完美保存，并为未来的发现做好准备。
总结表：
| 关键方面 | 描述 |
|---|---|
| 温度范围 | -45°C 至 -86°C |
| 主要目标 | 阻止生物/化学活动以实现长期保存 |
| 关键过程 | 玻璃化（玻璃状固化） |
| 常见样本 | 细胞、组织、DNA/RNA、疫苗、生物制剂 |
| 关键因素 | 防止冰晶损伤和分子降解 |
确保您关键样本的完整性
掌握超低温储存对于保护您宝贵的研究、生物样本库和药物材料至关重要。正确的设备和协议是可靠保存的基础。
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