为 SEM(扫描电子显微镜)分析准备样品涉及几个关键步骤,以确保样品得到妥善保存,并为详细成像做好准备。
需遵循的 7 个基本步骤
1.使用醛类进行初级固定
该步骤包括使用醛类固定样本中的蛋白质。醛类有助于保存蛋白质的结构并防止降解。
2.用四氧化锇进行二次固定
一级固定后,样本将进行四氧化锇二级固定。这一步骤有助于固定样本中的脂质,并为成像提供对比度。
3.溶剂脱水系列
然后使用乙醇或丙酮等一系列溶剂对样本进行脱水。脱水可去除样本中的水分,为干燥做好准备。
4.干燥
样品脱水后,需要进行干燥。可采用临界点干燥、冷冻干燥或简单的空气干燥等多种方法。目的是去除样品中的所有溶剂痕迹。
5.安装到柱子上
然后将干燥后的样品安装在一个小金属圆筒或圆盘上。在成像过程中,存根为样品提供了一个稳定的平台。
6.导电材料溅射涂层
为防止带电并提高导电性,使用溅射镀膜机在样品上镀一层薄薄的导电材料,如金或碳。这种涂层可确保电子束在 SEM 分析过程中与样品正常互动。
7.参考仪器制造商的指南
必须注意的是,具体的样品制备技术可能会因样品的性质和 SEM 分析的具体要求而有所不同。因此,必须参考仪器制造商的样品制备指南和规程。
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