制备用于 SEM 分析的样品可遵循以下步骤:
1.用醛类进行初步固定:该步骤包括使用醛类固定样品中的蛋白质。醛类有助于保持蛋白质的结构并防止降解。
2.用四氧化锇进行二次固定:在一级固定后,样本将进行四氧化锇二级固定。这一步骤有助于固定样本中的脂质,并为成像提供对比度。
3.溶剂脱水系列:然后使用乙醇或丙酮等一系列溶剂对样本进行脱水。脱水可去除样本中的水分,为干燥做好准备。
4.干燥:样品脱水后,需要进行干燥。可采用临界点干燥、冷冻干燥或简单的空气干燥等多种方法。目的是去除样品中的所有溶剂痕迹。
5.安装到柱子上:然后将干燥后的样品安装在一个小金属圆筒或圆盘上。在成像过程中,存根为样品提供了一个稳定的平台。
6.溅射导电材料涂层:为防止带电并提高导电性,使用溅射镀膜机在样品上镀一层薄薄的导电材料,如金或碳。这种涂层可确保电子束在扫描电镜分析过程中与样品正常互动。
值得注意的是,具体的样品制备技术可能会因样品的性质和扫描电镜分析的具体要求而有所不同。因此,必须查阅仪器制造商的样品制备指南和协议。
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