高压灭菌是微生物学中一种关键的灭菌工艺,依靠特定的条件来确保彻底消除微生物。关键参数包括蒸汽、压力、温度和时间。特定温度(121°C 或 132°C)下的饱和蒸汽是必不可少的,而且必须维持最短的时间才能达到杀菌效果。适当的排空和蒸汽渗透也是有效杀菌的关键。根据装载量和内容物的不同,条件也略有不同,但标准设置通常是在 15 磅/平方英寸的压力下在 121°C 温度下持续 15-20 分钟,或在较高压力下在 132°C 温度下持续较短时间。
要点说明:
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蒸汽质量和渗透:
- 干饱和蒸汽:适用于高压灭菌,因为它能确保有效的热传导和杀菌活性。
- 排气:必须排出腔体内的空气,让蒸汽充分渗透到被灭菌的材料中。气穴会阻碍蒸汽接触,导致灭菌不彻底。
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温度和压力:
- 标准条件:最常见的高压灭菌器设置为 121°C、15 psi(103 kPa 或 1.02 atm)。这一温度足以杀死大多数微生物,包括细菌、病毒和孢子。
- 更高的温度设置:在 132°C 和 206 千帕压力下,灭菌时间缩短至 10 分钟。这通常用于可承受更高温度的材料或更快的处理过程。
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使用时间:
- 标准持续时间:在 121°C 高温条件下,对于大多数负载,灭菌时间通常为 15-20 分钟。装载量较大或密度较高的材料可能需要 60 分钟。
- 在较高温度下缩短时间:在 132°C 下,灭菌时间缩短至 10 分钟,在某些应用中更为有效。
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负载考虑因素:
- 体积和密度:负载的大小和密度会影响所需的灭菌时间。较大或密度较高的物品可能需要延长灭菌时间,以确保完全灭菌。
- 物品的放置:物品的摆放必须能让蒸汽渗透到所有表面。高压灭菌器超载会妨碍蒸汽的有效接触。
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压力:
- 压力的作用:虽然压力本身并不能杀死微生物,但要达到灭菌所需的高温,压力是必不可少的。压力可确保蒸汽快速达到所需的温度,并持续保持这一温度。
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监测和验证:
- 生物指标:这些指标用于确认高压灭菌器周期的有效性,确认高抗药性微生物是否被消灭。
- 工艺指标:化学指示剂(如高压灭菌带)可直观地确认装载物已暴露在必要的条件下,但并不能保证灭菌。
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常见应用:
- 实验室设备:玻璃器皿、移液管和其他可重复使用的设备通常在高压灭菌器中消毒。
- 培养基和溶液:培养基、缓冲液和其他溶液必须消毒,以防污染。
- 生物危险废物:高压灭菌用于在处置生物危险材料前消除污染。
通过遵守这些条件,高压灭菌器为微生物学设备和材料的灭菌提供了可靠的方法,确保为实验和程序提供无菌环境。
总表:
参数 | 详细信息 |
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蒸汽质量 | 干燥饱和蒸汽可确保高效传热和杀菌活性。 |
温度 | 121°C(15 磅/平方英寸)或 132°C(更高压力),以有效灭菌。 |
时间 | 121°C 时 15-20 分钟;132°C 时 10 分钟。 |
压力 | 15 psi (121°C) 或 206 kPa (132°C) 以达到所需的温度。 |
装载考虑因素 | 尺寸、密度和正确放置会影响灭菌时间和效果。 |
监测 | 生物和化学指标可验证灭菌效果。 |
应用 | 实验室设备、培养基、溶液和生物危险废物灭菌。 |
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