高压灭菌器的验证方法有哪些？通过“三支柱方法”确保无菌性

简而言之，高压灭菌器的验证是通过结合三种不同的方法进行的：物理监测器、化学指示剂和生物指示剂。这些方法在一个结构化的过程中协同使用，以提供全面可靠的确认，证明高压灭菌器正在达到所需的无菌水平。

高压灭菌器验证不是单一的动作，而是一个正式的、有记录的过程，用于证明设备在实际操作条件下始终能对内容物进行灭菌。它超越了简单地操作机器，而是提供了客观证据，证明已达到定义的无菌保证水平（SAL）。

高压灭菌器验证的三大支柱

真正的验证依赖于多方面的方法。每种方法都提供了拼图中的一个不同部分，只有将它们结合使用时，才能全面了解高压灭菌器的性能。

物理监测器是在灭菌循环期间跟踪高压灭菌室内部物理状况的传感器和数据记录器。

这些包括高压灭菌器自身的温度探头、压力传感器和计时器。对于正式验证，外部校准的热电偶和数据记录仪被放置在腔室内部，以绘制其温度分布图并识别任何“冷点”。

此方法提供了循环物理参数的精确、带时间戳的记录，确认目标温度和压力是否已达到并保持了所需的时间。

化学指示剂是在暴露于一个或多个特定灭菌参数（如温度或蒸汽）时发生可见变化（通常是颜色变化）的材料。

这些最常见的是指示条或胶带。它们提供了快速的目视确认，表明高压灭菌器内的物品已暴露于灭菌过程。

然而，它们并不能作为无菌性的最终证明。化学指示剂变色仅确认达到了某个温度，但不能确认该温度保持了足够长的时间，或者蒸汽是否有效地穿透了负载以杀死微生物。

生物指示剂（BI）是验证中最关键的工具，因为它们直接衡量灭菌过程的杀灭能力。

生物指示剂由高度耐受的细菌孢子组成标准化群体，最常见的是枯草芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus）。已知这些孢子比实验室中常见的微生物更难被杀死。

循环结束后，对生物指示剂进行培养。如果没有生长发生，则表明所有其他潜在的生物负荷已被成功破坏，这提供了高度的信心。这是唯一直接证明已实现灭菌的方法。

这三大支柱被整合到一个正式的确认过程中，通常分为三个阶段，即 IQ、OQ 和 PQ。

这是初步的书面检查。它验证高压灭菌器是否是正确的型号，是否已根据制造商的规格正确安装，以及所有必要的公用设施（电力、水）是否正确连接。

在 OQ 阶段，对高压灭菌器进行测试，以确认其在空载时运行正常。此阶段涉及使用多个热电偶对腔室温度进行映射，以确保热量分布均匀，并识别腔室中最冷的位置。

这是最关键的阶段。使用代表您日常灭菌材料的实际负载（例如液体、器械、废弃物袋）对高压灭菌器进行测试。

在 PQ 期间，化学指示剂和生物指示剂被策略性地放置在整个负载中，特别关注 OQ 期间确定的“冷点”。成功的 PQ 运行证明高压灭菌器能够在实际操作条件下有效灭菌其预期内容物。

实现可靠的验证意味着要意识到可能导致虚假安全感的常见错误。

最常见的错误是假设指示剂胶带上的颜色变化等同于无菌。事实并非如此。化学指示剂仅确认暴露于热量，应用于日常监测，而不是作为验证的唯一依据。

将生物指示剂放置在腔室内易于接触的开放区域不是有效的测试。它们必须放置在蒸汽渗透最困难的位置：密集的包裹内部、液体容器内部或已识别的冷点内。

对一盘玻璃器皿有效的灭菌循环可能对一大瓶液体培养基失效。每种独特的负载类型和配置都需要其自身的性能确认，以确保其能够可靠地灭菌。

您的验证方法应与您的具体操作需求和法规要求相匹配。

如果您的主要重点是日常操作检查： 在每个负载中使用化学指示剂进行即时目视确认，并按设定的频率（例如每周或每月）运行一次生物指示剂测试，以验证持续性能。
如果您的主要重点是初始鉴定或维修后验证： 您必须使用外部热电偶和策略性放置的生物指示剂进行完整的 IQ、OQ 和 PQ 方案，以正式记录设备的性能。
如果您的主要重点是 GxP 或法规遵从性： 必须详细记录每种负载类型的 IQ、OQ 和 PQ 结果，建立定期的重新确认计划，并为调查任何生物指示剂故障制定明确的方案。

最终，稳健的验证是信心的基础，确保每个循环都能提供您的工作所依赖的无菌性。