使用高压灭菌器最关键的技巧是确保加压蒸汽（而不仅仅是热空气）直接接触待灭菌物品的每个表面。这需要通过正确装载以避免过度拥挤、加入适量的水，并运行一个完整的循环来实现，该循环在达到所需温度和压力（通常为 121°C (250°F)，15 psi，持续 30-60 分钟）之前，将腔室内的所有空气排出。
高压灭菌器的有效性取决于一个简单的原则：空气是灭菌的敌人。您的主要目标是清除腔室内的所有空气，以便过热蒸汽能够穿透并灭菌您的材料。未能做到这一点是循环失败最常见的原因。
核心原则：一切都与蒸汽有关
蒸汽是灭菌剂
高压灭菌器不使用干热灭菌。它使用高压下的饱和蒸汽。
这种加压蒸汽可以达到高温，更重要的是，它可以有效地将其热能传递给内部物品，使蛋白质变性并杀死微生物。
为何必须去除空气
困在腔室或容器内的空气起到绝缘作用，阻止蒸汽到达表面。
一个 121°C 的空气袋在灭菌方面的效果远不如 121°C 的蒸汽。循环必须包括一个主动清除空气并用蒸汽替换的阶段。
为成功循环做准备
检查并清洁腔室
开始前，务必进行快速目视检查，确保没有上次运行遗留的物品。
确保内部腔室，尤其是排水过滤器清洁，没有可能堵塞系统的碎屑。
加入适量的水
高压灭菌器通过烧水产生蒸汽，通常是去离子水或蒸馏水。
查阅您的特定型号的用户手册以确认正确的体积。水量不足可能会导致循环中止或损坏加热元件。
装载物品以实现最大蒸汽渗透
这是操作员控制的最关键步骤。切勿使腔室过载。
在所有物品之间留出足够的空间——顶部、底部和侧面——为蒸汽循环创造清晰的路径。
以有利于排气和蒸汽接触的方式放置物品。例如，将袋子侧放，将瓶子或烧杯内部留有少量水。
了解权衡和安全规程
密封容器的危险
切勿将液体放入密封容器中进行高压灭菌。当液体受热时，它会膨胀并沸腾，产生巨大的压力，可能导致容器爆炸。
始终使用带通气盖的容器，或确保标准螺旋盖至少松开一整圈。
不兼容的材料
某些材料绝不应放入高压灭菌器中，因为它们可能会熔化或释放有害烟雾。
避免使用油和油脂等防水材料，因为蒸汽无法穿透它们。不要使用聚乙烯 (PE) 托盘，因为它们很可能会熔化并损坏高压灭菌器。
培训的关键作用
未经针对所用特定型号的正式培训，任何人都不得操作高压灭菌器。
此培训必须涵盖正确的装载、循环选择、应急程序以及所需个人防护设备 (PPE) 的使用。
所需个人防护设备 (PPE)
装载，尤其是卸载高压灭菌器时，务必佩戴耐热手套、实验服、护目镜和包头鞋。
请记住，循环完成后，物品仍会长时间保持危险的高温。开门时请注意残留蒸汽。
执行安全有效的循环
正确密封门
确保高压灭菌器门正确关闭，并且安全夹具或锁定机构完全接合。密封不良将阻止腔室达到所需压力。
排气并建立压力
循环将通过烧水产生蒸汽开始。这种蒸汽将取代较冷、密度较大的空气，这些空气通常通过排放阀排出。
一旦空气被清除，阀门将关闭，允许蒸汽压力和温度上升到灭菌设定点（例如，121°C 和 15 psi）。
监控循环
灭菌计时器仅在腔室达到目标温度和压力后才开始计时。典型的循环时间为 30 到 60 分钟。
允许适当冷却
灭菌阶段结束后，加热器将关闭。您必须让高压灭菌器冷却，直到压力表读数为零。
切勿在腔室仍处于加压状态时尝试开门。这极其危险，可能导致蒸汽爆炸。
释放压力并小心开门
一旦压力归零，您可以缓慢开门。站在侧面，而不是正前方，以避免任何将冲出的残留蒸汽。
为您的目标做出正确选择
- 如果您的主要重点是灭菌玻璃器皿或仪器： 优先考虑物品之间的适当间距，并使用灭菌指示剂确认循环有效。
- 如果您的主要重点是灭菌液体（培养基）： 使用带通气盖的容器，允许更慢、更仔细的减压循环以防止溢出，并佩戴全套 PPE。
- 如果您的主要重点是净化生物危害废物： 确保使用适当标记的、可高压灭菌的袋子，将其放入二级塑料托盘中，并运行经过验证的时间（通常为 60 分钟或更长时间）。
掌握这些程序将使高压灭菌器从一台简单的机器转变为确保安全和科学完整性的可靠工具。
总结表：
| 关键提示 | 目的 | 示例 |
|---|---|---|
| 避免过度拥挤 | 确保蒸汽接触所有表面 | 在腔室中的物品之间留出空间 |
| 彻底排气 | 防止气囊绝缘 | 运行主动排气的循环 |
| 使用正确的 PPE | 防止烫伤和蒸汽 | 佩戴耐热手套和实验服 |
| 松开容器盖 | 防止压力积聚引起的爆炸 | 将螺旋盖松开一整圈 |
| 允许适当冷却 | 避免蒸汽爆炸 | 等待压力表读数为零后再开门 |
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