毫无疑问,实验室中最常见的灭菌技术是使用高压灭菌器进行的蒸汽灭菌。该方法之所以受到青睐,是因为它能极其有效地杀死所有形式的微生物生命——包括顽固的细菌孢子——并且具有可靠性、速度和无毒性等优点。它已成为大多数常见实验室材料灭菌的黄金标准。
虽然高压灭菌器是实验室灭菌无可争议的主力,但关键的决定不是什么最常见,而是什么最合适。方法的选择必须始终与材料对热、压力和湿度的耐受性相匹配。
蒸汽灭菌的工作原理:高压灭菌器
高压灭菌器本质上是一个复杂的压力锅。它不仅使用热量;它使用高压饱和蒸汽来对物品进行灭菌。
加压蒸汽的原理
高压灭菌器有效性的关键在于它能够创造一个水在高于 100°C (212°F) 的温度下沸腾的环境。在压力下,这种过热的蒸汽可以快速穿透材料并传递致命的热量。
这个过程会不可逆地使微生物中必需的蛋白质和酶变性,从而确保它们的破坏。
标准操作条件
实验室高压灭菌最常见的循环条件是使腔室在 121°C (250°F) 的温度下,在 15 磅/平方英寸 (psi) 的压力下保持至少 15-20 分钟。
确切时间可能因被灭菌批次的大小和密度而异。
其用途
高压灭菌器是处理各种常见实验室用品的首选方法。
这包括玻璃器皿(烧瓶、烧杯、试管)、手术器械、不锈钢设备、水溶液和培养基,以及生物危害废物的去污处理。
何时不能使用高压灭菌器:其他方法
对于不能承受高压灭菌器的高温和湿度的材料,实验室会依赖其他几种关键技术。
干热灭菌
此方法使用烘箱通过热的干燥空气对物品进行灭菌。由于干热传递能量的效率低于蒸汽,因此需要更高的温度和更长的暴露时间(例如,170°C 持续 2 小时)。
它主要用于易受湿气损坏的材料,如某些粉末、油类和特定类型的玻璃器皿。
化学灭菌
对于对热和湿气都敏感的物品,如塑料、光纤和精密电子设备,则使用化学灭菌法。
这通常涉及在专用腔室内暴露于有毒气体,如环氧乙烷 (EtO)。虽然有效,但之后需要长时间的通风以清除有害的残留气体。
过滤
此技术用于对热敏液体进行灭菌,例如某些药物溶液、维生素或蛋白质基培养基补充剂。
液体通过孔径足够小(通常为 0.22 微米)的过滤器,以捕获并去除细菌。需要注意的是,过滤会去除微生物,但不会杀死它们,并且它可能无法去除所有病毒或内毒素。
了解权衡
没有一种方法对所有应用都是完美的。了解优点和缺点是正确实验室程序的基础。
高压灭菌器(蒸汽)
- 优点: 极其有效、快速、无毒且操作成本低廉。
- 缺点: 会损坏对热敏感的材料(如大多数塑料)和对湿气敏感的物品。可能会腐蚀某些金属。
干热法
- 优点: 对粉末和油类等对湿气敏感的材料有效。
- 缺点: 过程非常缓慢。高温会损坏许多物品,且效率低于蒸汽。
化学气体(环氧乙烷)
- 优点: 对热和湿气敏感的物品灭菌效果极佳。
- 缺点: 气体具有剧毒和易燃性,需要严格的安全规程和较长的通风时间以确保用户安全。
过滤法
- 优点: 在不破坏热敏液体的情况下对其进行灭菌的唯一有效方法。
- 缺点: 不能去除所有病毒,如果过滤器破裂或未正确安装,过滤器本身可能成为失效点。
为您的材料做出正确的选择
您选择的灭菌方法完全取决于您需要灭菌的物体。
- 如果您的主要关注点是玻璃器皿、培养基或生物危害废物: 高压灭菌器是您最可靠、最高效的选择。
- 如果您的主要关注点是热敏塑料或复杂仪器: 化学气体灭菌法可能是必需的方法。
- 如果您的主要关注点是热敏液体,如血清或抗生素: 您必须使用无菌过滤来保持溶液的完整性。
- 如果您的主要关注点是耐水性差的粉末或油类: 干热灭菌法是适当的技术。
选择正确的灭菌方案是实验室安全和实验有效性的基本支柱。
总结表:
| 灭菌方法 | 主要用途 | 主要优势 | 主要局限性 |
|---|---|---|---|
| 蒸汽(高压灭菌器) | 玻璃器皿、培养基、生物危害废物 | 高效、快速、无毒 | 会损坏对热/湿气敏感的材料 |
| 干热法 | 粉末、油类、对湿气敏感的物品 | 适用于不耐水的物品 | 过程缓慢,需要高温 |
| 化学气体(例如 EtO) | 对热/湿气敏感的塑料、仪器 | 对精密物品有效 | 有毒气体,需要长时间通风 |
| 过滤法 | 热敏液体(血清、抗生素) | 保持溶液完整性 | 不杀死微生物,只去除它们 |
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