RNA 的稳定性与温度有很大关系,不同储存条件下的降解率差异很大。虽然 RNA 在超低温(-20°C 至 -80°C)下仍能保持长期稳定,但在较高温度下,特别是在 4°C 以上,其完整性会逐渐下降。室温下短期储存是可行的,但与冷藏或冷冻条件相比,降解风险更高。
要点说明:
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超低温储存(-20°C 至 -80°C)
- RNA 在 -20°C 或 -80°C 温度下可稳定保存数月至数年。
- 反复冻融循环(最多 10 次)不会使 RNA 明显降解,因此这些温度非常适合长期保存。
- 但应避免使用无霜冷冻箱,因为温度波动可能会影响稳定性。
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冷藏储存(4°C)
- RNA 在 4°C 下可储存 14 天而不会明显降解。
- 储存缓冲液可能会随着时间的推移而蒸发,因此建议将试管密封。
- 适合短期实验,但不适合长期储存。
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室温(20-25°C)
- RNA 在室温下可保持稳定约 48 小时,但超过这个时间窗口,降解风险就会增加。
- RNase 污染或暴露在紫外线下会加速降解,因此处理时的预防措施至关重要。
- 最好用于即时处理而非储存。
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影响 RNA 稳定性的关键因素
- RNase 污染:即使是微量的 RNase 也会迅速降解 RNA,因此必须使用不含 RNase 的试管和试剂。
- 缓冲液成分:保存在 RNase 抑制缓冲液(如 TE 缓冲液或商用 RNA 稳定溶液)中可提高稳定性。
- 样品浓度:稀释的 RNA 降解更快;浓缩的样本更有弹性。
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给购买者的实用建议
- 优先考虑 不含 RNase 的耗材 (试管、吸头),将污染风险降至最低。
- 适用于没有超低温冷冻箱的实验室、 RNA 稳定试剂 (如 RNA later)可延长室温稳定性。
- 考虑 冻干 RNA 因为冻干 RNA 比液体样本更能抵抗降解。
通过了解这些随温度变化的稳定性曲线,研究人员和采购人员可以就 RNA 处理、储存设备和耗材做出明智的决定,以确保样本的完整性。
汇总表:
储存温度 | 稳定性持续时间 | 主要考虑因素 |
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-20°C至-80°C | 数月至数年 | 避免使用无霜冷冻箱;即使经过多次冻融循环也能保持稳定。 |
4°C (冷藏) | 最多 14 天 | 密封试管,防止缓冲液蒸发。 |
室温(20-25°C) | ~48 小时 | 降解风险高;使用不含 RNase 的处理方法。 |
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