高压灭菌器是许多实验室的重要设备,可确保仪器和材料不含有害微生物。但怎样才能使高压灭菌器真正有效呢?以下是决定其成功与否的五个关键因素。
1.温度和时间:灭菌的基础
高压灭菌器依靠压力下的饱和蒸汽,在一定时间内使灭菌室温度达到至少 250 华氏度(121 摄氏度)。一般情况下,时间为 30 至 60 分钟。温度和时间至关重要,因为它们直接影响蒸汽杀死微生物的能力。温度越高,所需的灭菌时间越短。例如,温度为 121°C、压力为 108 千帕(kPa)时,灭菌时间为 20 分钟。而在 134°C 和 206 千帕压力下,只需 10 分钟(Dockery,2012 年)。
2.蒸汽质量:高压灭菌器的命脉
蒸汽质量对有效灭菌至关重要。蒸汽必须达到饱和状态,压力必须正确,以确保蒸汽能达到并保持必要的温度。蒸汽必须与要灭菌的材料直接接触。高压可使蒸汽温度超过 100°C,从而提高效率。
3.正确装载:安排的艺术
将材料装入高压灭菌器的方式也至关重要。装载过多会妨碍蒸汽的充分循环,从而可能导致装载的某些部分灭菌不充分。必须确保高压灭菌器能够处理所灭菌材料的体积和类型,并留出足够的空间和蒸汽渗透。
4.防止空气滞留:内部敌人
高压灭菌器内的空气会大大降低其灭菌效果。与蒸汽相比,空气是热的不良导体,它的存在会产生冷点,导致灭菌失败。预循环真空、自由蒸气和脉冲自由蒸气等技术可用于去除空气和提高蒸汽穿透力,尤其是在多孔负载中。
5.监测和验证:灭菌的看门狗
灭菌过程的有效性可通过各种方法进行监控,以确保高压灭菌器正常运行并达到无菌状态。这种验证对于保持灭菌过程的完整性和确保符合监管标准至关重要。
总之,高压灭菌器必须在精确的温度、时间和压力条件下运行,并使用高质量蒸汽和正确的装载技术,才能确保完全灭菌。监控和验证对于确认在整个灭菌过程中满足并保持这些条件至关重要。
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