对于大多数实验室玻璃器皿的常规灭菌，标准的高压灭菌设置是在 121°C (250°F) 和 15 psi 压力下运行一个周期，至少持续 15 到 20 分钟。此持续时间指的是负载保持在目标温度下的时间，而不是总循环时间，总循环时间会更长，以计入加热和冷却阶段。
具体的数字只是一个起点。真正的灭菌与其说是取决于单一的设置，不如说是取决于一个基本原则：确保饱和蒸汽在所需持续时间内与每个表面完全接触，这是一个随负载的大小和密度而显着变化的因素。
高压灭菌器如何实现灭菌
高压灭菌器不仅仅是一个简单的烘箱。它是一种高效的灭菌器，利用加压蒸汽来杀死所有微生物生命，包括能在沸水中存活的耐热细菌孢子。
加压蒸汽的作用
高压灭菌器有效性的关键在于压力下的湿热。通过增加腔室内的压力，高压灭菌器提高了水的沸点。这使得它能够在远高于 100°C 的温度下产生饱和蒸汽。这种高温蒸汽会迅速使微生物内必需的蛋白质和酶变性，从而导致其死亡。
温度和时间的关键关系
灭菌是温度和时间的函数。行业标准 121°C 是可靠杀死最顽固的细菌内孢子所需的最低温度。在此温度下，至少需要 15 分钟的暴露时间。如果负载大、密度高或含有液体，则必须延长此时间，以确保负载中心达到 121°C 并保持该温度足够长的时间。
标准设置和关键变量
虽然 121°C 保持 15-20 分钟是基准，但您必须根据您正在灭菌的物品来调整循环。现代高压灭菌器通常具有针对“玻璃器皿”或“干燥物品”的预编程循环。
玻璃器皿的基准
对于少量、轻微堆积的空硼硅酸盐（派热克斯）烧杯或烧瓶，在 121°C 下进行 20 分钟的灭菌时间是一个可靠的标准。这提供了超出绝对最短 15 分钟的安全裕度。
根据负载大小和密度进行调整
这是最关键的变量。一个紧密堆积的大篮子比架子上放的几个烧杯需要更长的时间才能让蒸汽渗透。灭菌阶段的计时器仅在腔室传感器达到 121°C 之后才开始计时，但该传感器不知道您最大的烧瓶内部是否仍然是冷的。
对于大负载或高密度负载，通常的做法是将灭菌时间延长至 30 分钟或更长时间，以确保蒸汽完全渗透。
干燥循环的重要性
灭菌阶段后，许多高压灭菌器会运行一个灭菌后干燥阶段。这利用真空和热量来蒸发玻璃器皿上残留的任何冷凝水。使用此功能对于防止湿包至关重要，因为湿气可能会通过无菌包装吸附微生物，从而影响无菌性。
常见陷阱及避免方法
不正确使用高压灭菌器不仅会导致灭菌失败，还可能带来重大的安全隐患。
装载不当
不要将高压灭菌腔室装得太满。在物品之间留出充足的空间，水平和垂直方向都要留出，以便蒸汽循环正常进行。将物品侧放也有助于防止空气被困在内部，从而阻碍蒸汽接触。
密封容器和潜在危险
切勿高压灭菌密封容器。随着温度升高，密封瓶或烧瓶内部的压力会急剧增加，存在爆炸风险。务必使用带通风盖的瓶盖，或用铝箔松松地盖住烧瓶和瓶子的开口。
忘记热冲击
快速的温度变化会导致玻璃破裂或碎裂。对于较厚的玻璃器皿或灭菌液体尤其如此。在打开门之前，务必让高压灭菌器循环完成其缓慢冷却或排气阶段，并在处理玻璃器皿之前让其冷却到安全温度。
不使用灭菌指示剂
您如何知道循环是否成功？请务必使用灭菌指示剂。高压灭菌指示胶带变色表明它已暴露于高温，但它不能确认灭菌。为了进行真正的验证，请使用含有孢子的生物指示剂（例如，嗜热脂肪芽孢杆菌）来确认该循环对微生物是致命的。
为您的循环做出正确的选择
请使用以下指南为您特定的需求选择合适的循环。
- 如果您的主要重点是一批小型的常规玻璃器皿： 121°C 下的标准 20 分钟循环就足够且高效。
- 如果您的主要重点是大量、高密度的负载： 将灭菌时间延长至 30-45 分钟，以确保蒸汽完全渗透到负载中心。
- 如果您的主要重点是灭菌玻璃器皿内的液体： 使用专用的“液体”循环，该循环使用较慢的排气阶段以防止液体沸腾溢出，并根据液体体积延长灭菌时间。
最终，成功的灭菌取决于对蒸汽渗透原理的理解和对过程的验证。
摘要表：
| 设置/变量 | 玻璃器皿标准 | 关键考虑因素 |
|---|---|---|
| 温度 | 121°C (250°F) | 杀死耐热孢子的最低温度。 |
| 压力 | 15 psi | 产生饱和蒸汽以实现有效灭菌。 |
| 时间（灭菌阶段） | 15-20 分钟（最低） | 腔室达到 121°C 后开始计时；大/高密度负载需延长（例如 30-45 分钟）。 |
| 负载类型 | 空、干燥的玻璃器皿 | 根据液体调整循环（使用慢速排气），并确保蒸汽循环正常。 |
| 关键因素 | 蒸汽渗透 | 避免装载过多；使用灭菌指示剂（例如生物指示剂）进行验证。 |
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