实验室玻璃器皿的灭菌规程是什么？实验室级无菌操作的分步指南

实验室玻璃器皿灭菌的标准规程始于彻底清洁以去除所有残留物，然后使用干热烘箱或高压灭菌器进行灭菌循环。在这两种方法之间做出选择是最关键的决定，因为它取决于您的工作性质和待灭菌的材料。

灭菌的核心挑战不仅仅是遵循一个步骤，而是理解其背后的原理。真正的无菌是通过首先通过清洁去除所有物理和化学残留物，然后选择适当的基于热的方法——湿热（高压灭菌器）或干热——来消除所有微生物生命来实现的。

基础：为什么正确清洁是不可或缺的

在施加任何热量之前，玻璃器皿必须在物理和化学上是干净的。污垢、油脂或化学薄膜会阻碍灭菌，这种现象被称为“绝缘效应”。

任何碎屑，从一粒灰尘到一层油膜，都可能使微生物免受灭菌剂（热量）的影响。这会在无菌表面上留下非无菌的“口袋”，从而完全使灭菌过程失效。

首先使用合适的实验室洗涤剂和刷子对手动擦洗玻璃器皿。确保清洁到所有内部表面。擦洗后，用自来水彻底冲洗，以去除所有洗涤剂残留物。

自来水冲洗后，用去离子水（DI）或蒸馏水进行最后一次冲洗（通常 3 次）。这一关键步骤可以去除自来水中留下的矿物质沉积物和其他离子，这些物质可能会在加热过程中粘在玻璃上，并干扰未来的实验。

玻璃器皿热灭菌的两种主要方法是干热和湿热。它们不能互换使用。

干热灭菌通过氧化杀死微生物。它是必须保持干燥的物品的首选方法，例如空烧瓶、瓶子、金属仪器、油或粉末。

该过程涉及将清洁、干燥的玻璃器皿放入热空气烘箱中。常见的温度和时间组合包括170°C (340°F) 保持 1 小时或160°C (320°F) 保持 2 小时。请记住，此时间仅在烘箱内容物达到目标温度后才开始计算。

高压灭菌器使用高压饱和蒸汽进行灭菌。它比干热效率高得多，因为蒸汽在物品上冷凝时能更有效地传递热量。

这是大多数实验室的黄金标准，用于灭菌含有液体的玻璃器皿（如培养基）、手术器械和一般实验室设备。标准循环是121°C (250°F) 在 15 psi 压力下至少 15-20 分钟。所需时间可能因体积较大而增加。

此通用规程可适用于干热烘箱或高压灭菌器。

如上所述，用洗涤剂清洗，用自来水冲洗，最后用去离子水冲洗。如果使用干热烘箱，请确保玻璃器皿完全干燥。

用铝箔盖住烧瓶、烧杯和瓶子的开口。这可以防止污染物在循环完成后进入。如果使用高压灭菌器，您也可以使用专用的高压灭菌袋或纸张。在物品上贴一条灭菌指示条，以便直观确认其已通过循环。

将物品排列在烘箱或高压灭菌器中，以确保空气或蒸汽能够自由流通。不要使腔室过载。如果可能，物品之间或与腔室壁不应接触。

根据您选择的方法和待灭菌的物品选择适当的循环（例如，干烘箱中 170°C 保持 1 小时，或高压灭菌器中 121°C 保持 15 psi 20 分钟）。始终在循环中包含生物或化学指示剂，以验证是否达到了灭菌条件。

让灭菌器完成其循环，包括冷却阶段。切勿打开仍在加压的热高压灭菌器。循环完成后且腔室安全打开后，即可取出玻璃器皿。将无菌物品存放在清洁、干燥、无尘的环境中，直到需要使用，并保持铝箔盖到位。

选择错误的方法可能导致实验失败、设备损坏或灭菌不完全。

高压灭菌器的主要优点是其效率。它在比干热更低的温度和更短的时间内达到无菌状态。但是，它不适用于对水敏感的材料，如油和粉末，并且产生的玻璃器皿将是湿的。

干热烘箱的主要好处是能够产生无菌、干燥的玻璃器皿，可用于非水性物质。主要缺点是循环时间非常长，并且需要的高温可能会损坏某些带有橡胶密封件的塑料或物品。

最常见的失败是清洁不彻底，这会留下保护微生物的生物膜。其他常见错误包括装载不当（过度拥挤）、为负载大小选择错误的循环时间和灭菌后污染（由于储存或处理不当）。

您的具体目标决定了正确的规程。

通过将正确的灭菌规程与您的特定需求相匹配，您可以确保工作的完整性和成功。