在标准高压灭菌循环中，实际的灭菌阶段——微生物被积极杀灭的阶段——通常在121°C (250°F) 和15 psi的压力下持续至少20分钟。然而，这只是整个过程的一部分。从开始到结束的完整高压灭菌运行通常需要更长时间，通常在60到90分钟或更长时间，这完全取决于待灭菌的物品。
最常见的错误是将灭菌时间与总循环时间混淆。虽然核心灭菌可能只需20分钟，但包括升温、排气和关键冷却期在内的完整循环可以很容易地使持续时间增加两倍，尤其是在灭菌液体时。
高压灭菌循环的构成
要了解总时间投入，您必须查看整个过程，它由几个不同的阶段组成。20分钟的数字仅指暴露阶段。
阶段1：升温和排气
在灭菌开始之前，腔室必须达到目标温度和压力。此阶段涉及对腔室进行排气，以去除较冷的常温空气，并用饱和蒸汽取代它。
适当的排气至关重要，因为气囊可以充当绝缘屏障，阻止蒸汽接触所有表面，从而导致灭菌失败。此阶段可能需要10-20分钟。
阶段2：灭菌（暴露）
这是人们最熟悉的阶段。一旦达到目标温度和压力（例如121°C和15 psi），灭菌期的计时器就开始计时。
在此期间，高温蒸汽会使微生物的基本蛋白质和酶变性，使其失去活性。在这一温度下，20分钟的暴露时间是大多数通用实验室应用的标准。
阶段3：排气和冷却
暴露时间结束后，必须释放蒸汽，并且负载必须冷却。这是循环中最具可变性的部分，也是总运行时间的主要因素。
排气方法在很大程度上取决于负载。此阶段可能持续15分钟到一小时以上。
什么决定了总循环时间？
“典型”运行是一个神话；负载决定了时间。有几个因素会极大地影响高压灭菌循环的总持续时间。
负载类型：固体与液体
这是循环时间的最大决定因素。
固体、干燥物品（玻璃器皿、金属器械、废弃物）可以使用“快速排气”，即快速释放压力。它们的冷却时间相对较快。
液体（培养基、缓冲液）需要“慢速排气”。过快地释放压力会导致过热液体剧烈沸腾溢出，从而导致体积损失、潜在污染，甚至玻璃器皿破碎。液体所需的缓慢、受控的压力释放会显著延长循环时间。
负载大小和密度
大而密集的负载比小而松散的负载需要更长的时间来加热。蒸汽需要更多时间才能渗透到包装的中心或最大的容器中。
因此，不应过度填充高压灭菌器。在物品之间留出空间可确保有效的蒸汽循环和有效的灭菌。
了解权衡和风险
在不了解所涉及的原理的情况下试图加快高压灭菌循环可能会导致灭菌失败或重大的安全隐患。
急于冷却阶段的危险
强制液体循环更快冷却极其危险。在液体仍处于过热状态（高于其在正常大气压下的沸点）时打开高压灭菌器门会导致它们爆炸性沸腾。
这可能导致严重烧伤、设备损坏和完全未灭菌的培养基。务必让循环按程序完全完成。
气囊导致的无效灭菌
如果排气阶段不完整，滞留的空气会阻止负载的一部分达到所需的温度。循环会完成，但物品不会是无菌的。
这就是为什么正确装载与设置正确的时间和温度一样重要。确保蒸汽有清晰的路径到达所有表面。
有效规划您的高压灭菌运行
利用您的负载性质来估算您的时间投入，并确保安全、成功的结果。
- 如果您的主要重点是灭菌固体物品（玻璃器皿、器械、包装工具）：您可以计划一个更快的总循环，可能大约60分钟，因为快速排气和冷却都是合适的。
- 如果您的主要重点是灭菌液体（培养基、水、缓冲液）：您必须计划一个更长的循环，通常为90分钟或更长时间，以适应必不可少的慢速排气和冷却阶段。
- 如果您的目标是绝对的无菌性：使用生物指示剂或高压灭菌胶带验证您的循环参数和装载实践对您的特定负载是否有效。
了解完整的循环——而不仅仅是20分钟的暴露时间——是安全、高效和有效灭菌的关键。
总结表：
| 循环阶段 | 典型持续时间 | 主要功能 |
|---|---|---|
| 升温和排气 | 10-20分钟 | 排出空气，将腔室加热至121°C (250°F) |
| 灭菌（暴露） | 至少20分钟 | 用饱和蒸汽杀死微生物 |
| 排气和冷却 | 15-60+分钟 | 安全冷却负载；液体慢速，固体快速 |
| 总循环时间 | 60-90+分钟 | 高度取决于负载类型（液体需要更长时间） |
确保您实验室的灭菌安全有效
正确规划高压灭菌运行对于安全和实验成功都至关重要。KINTEK 专注于提供可靠的实验室设备和耗材，包括专为精确循环控制和用户安全而设计的高压灭菌器。
让我们帮助您每次都实现完美的灭菌。 我们的专家可以协助您选择适合您特定需求的高压灭菌器，无论您主要处理液体、固体还是两者的组合。
立即联系 KINTEK 讨论您实验室的灭菌要求，并了解我们的解决方案如何提高您实验室的效率和安全性。
